miR-4539通过靶向作用于叉头盒转录因子1抑制胶质瘤细胞生长的实验研究

作者：王宏欣; 付苏; 淳雪莉; 张帆^*

来源：中国比较医学杂志, 2022, 32(05): 91-97.

• 脑胶质瘤
• miRNA
• 叉头盒转录因子1

目的 探讨miR-4539抑制胶质瘤细胞生长的效应及相关机制。方法 采用RT-PCR法检测脑胶质瘤标本和7株胶质瘤细胞株中miR-4539的表达水平。采用CCK-8法、流式细胞法、Western blot法检测miR-4539在胶质瘤细胞中的作用。采用双荧光素酶实验验证叉头盒转录因子1(Foxp1)是否是miR-4539的直接靶点。构建小鼠移植瘤模型，探讨miR-4539转染对小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果 (1)miR-4539在胶质瘤组织中的表达水平显著低于正常脑组织(P<0.05)。miR-4539在7个常用的人脑胶质瘤细胞系(U87、U251、U373、T98G、LN18、LN229、SF295)中的表达量显著低于人正常脑胶质细胞株HEB(P<0.05)。(2)与miR-NC组相比，miR-4539转染72 h后，T98G细胞和LN18细胞中miR-4539的表达水平都显著增加(P<0.05)。CCK-8检测显示，外源性miR-4539过表达可显著抑制T98G和LN18细胞的增殖。同时可诱导T98G和LN18细胞周期阻滞，G0/G1期细胞百分率增加，S期细胞百分率降低，且细胞周期调控蛋白cyclinD1、cyclinE1和Ser780的表达水平也显著降低(P<0.05)。(3)荧光素酶报告显示，Foxp1是miR-4539的直接靶点，可被miR-4539直接调控。接种T98G细胞后6周，miR-4539转染组小鼠移植瘤平均体积、平均重量均显著小于miR-NC组(P<0.05)。(4)T98G和LN18细胞过表达miR-4539后，Foxp1mRNA和蛋白表达都显著降低，免疫荧光结果也确认，miR-4539降低了Foxp1在T98G细胞和LN18细胞中的表达。结论 miR-4539可通过靶向作用于Foxp1发挥抑癌因子效应，有望成为脑胶质瘤患者诊断和治疗的新靶点。

• 单位
  四川大学华西医院