摘要

为解决纳米碳点无对照品而难以定量的缺陷,该文利用碳点稳定的荧光性,以纯荧光化合物为“替代对照品”,建立碳点的细胞内及组织内含量测定方法。将具有良好成像性能的碳点作为候选碳点,以甲酚紫、罗丹明6G为对照品,建立候选碳点及其叶酸偶联物HeLa细胞内以及生物组织中的含量测定法及其方法学验证。结果表明,三种候选碳点DCCDs、ACUCDs、UCPG-Fe及其叶酸偶联物在HeLa细胞内和组织内,均在一定浓度范围内具有良好的线性关系(r2=0.993 3~0.999 2),平均回收率为86.61%~102.5%,精密度RSD在2.82%~3.91%之间。以此分别检测出细胞内DCCDs和FA-DCCDs在摄取时间3、6、9、12 h的纳米碳点含量在0.125 5~0.266 5μg/mL之间及0.891 7~1.239μg/mL之间;肝、肾组织内DCCDs在摄取时间20、30、40、50、60、70 min的纳米碳点含量分别在1.132~1.756μg/mL之间及0.335 8~0.704 3μg/mL之间。所建方法适用于候选碳点及其叶酸偶联物在细胞内和肝肾组织中碳点的含量测定,可为荧光碳点在生物诊疗的深入研究提供质量控制方面的研究基础,也为纳米材料的定量方法的建立提供了新的思路。