干扰素调节因子4基因敲除加重缺血性脑卒中小鼠脑神经功能损伤

作者：余信远; 简志宏^*; 刘仁忠; 冯艳萍

来源：武汉大学学报(医学版), 2023, 44(07): 793-799.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2022.0361

• 缺血性脑卒中
• 干扰素调节因子4
• 巨噬细胞极化
• 炎性反应
• 神经功能损伤

目的：明确缺血性脑卒中(IS)后不同区域脑组织中干扰素调节因子4(IRF4)表达水平的变化趋势并探讨其在IS后神经功能损伤中的保护作用与可能机制。方法：首先通过短暂性大脑中动脉闭塞(tMCAO)构建小鼠IS模型(包括野生型和IRF4基因敲除组)，随后分别利用RT-PCR与Western Blot检测核心梗死区域、缺血半暗带与对侧正常脑组织内IRF4 mRNA与蛋白表达水平。同时利用ELISA检测缺血半暗带区域促炎细胞因子IL-1β、IL-6与TNF-α的表达水平。分别利用RT-PCR与Western Blot检测M1型巨噬细胞标志物iNOS与M2型巨噬细胞标志物Arg-1的mRNA与蛋白表达水平；随后进行神经功能评分与水迷宫试验检测逃逸潜伏期(EL)，利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测小鼠脑梗死体积，同时利用免疫荧光染色检测细胞凋亡。结果：缺血半暗带IRF4表达水平较核心梗死区域与对侧正常脑组织均明显增加。此外，缺血半暗带促炎细胞因子IL-1β、IL-6与TNF-α表达均明显增加，且与IRF4表达水平呈明显负相关；iNOS表达明显上调且Arg-1表达显著减少。而IRF4基因敲除导致IS小鼠脑梗死体积增加且神经功能明显恶化。IRF4基因敲除致使IS小鼠脑组织促炎细胞因子表达显著上调，巨噬细胞标志物检测表明IRF4基因敲除致使巨噬细胞向M1型极化。此外，IRF4基因敲除导致神经元凋亡明显增加。结论：IS显著诱导缺血半暗带IRF4表达，IRF4敲减可导致IS小鼠炎症反应加重，巨噬细胞向M1型极化且神经功能损伤明显恶化。因此，IRF4表达可能通过调节巨噬细胞极化，抑制促炎细胞因子表达，继而在IS中发挥抗炎和脑保护作用。

• 单位
  武汉大学人民医院