miR-181a-5p在皮肤成纤维样细胞衰老中的作用和机制

作者：黄燕; 杨艳清; 万睿^*; 周进飞; 张层层; 刘睿; 许其军; 张名; 李慧娟

来源：华中科技大学学报(医学版), 2022, 51(06): 830-889.

• 细胞衰老
• H2O2
• miR-181a-5p
• 自噬
• 凋亡

目的 观察miR-181a-5p在H2O2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞衰老过程中的表达变化，并探讨其表达水平对细胞自噬和凋亡的影响。方法 采用200μmol/L H2O2诱导大鼠皮肤成纤维样RS1细胞6 h,构建细胞衰老模型。将细胞分为5组：H2O2处理组、mimic-NC组、mimic组、inhibitor-NC组和inhibitor组，采用脂质体转染技术将miR-181a-5p mimic、inhibitor等转染入相应的细胞中。MTT法检测细胞增殖活性；qPCR检测细胞miR-181a-5p表达水平。利用流式细胞术检测细胞凋亡；利用吖啶橙染色观察细胞自噬水平；采用Western blot检测细胞LC3B、p62、Beclin-1、自噬相关基因5(autophagy related 5,ATG5)蛋白表达水平。结果 与正常RS1细胞比较，H2O2诱导后的RS1细胞增殖活性显著降低(P<0.05),而miR-181a-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与H2O2处理组比较，mimic组RS1细胞排列紊乱，细胞轮廓不清晰，碎片较多，凋亡率显著升高(P<0.05),自噬水平降低，Beclin-1和ATG5表达显著降低(均P<0.05);inhibitor组RS1细胞轮廓清晰，过度伸展、空泡化的细胞减少，凋亡率显著降低(P<0.05),自噬水平升高，Beclin-1和ATG5表达显著升高(均P<0.05)。结论 H2O2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞miR-181a-5p表达增加，且上调miR-181a-5p表达，可抑制细胞自噬、促进细胞凋亡。

• 单位
  武汉市第三医院