丝瓜ACC合成酶的原核表达、分离纯化及性质鉴定

作者：高波; 曾庆银; 陆海; 付学奇

来源：吉林大学学报(理学版), 2004, (04): 622-624.

DOI：10.13413/j.cnki.jdxblxb.2004.04.032

• 丝瓜ACC合成酶
• 包涵体
• 蛋白质纯化

将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒,转化为大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达,表达蛋白以包涵体形式存在.包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析,得到纯化蛋白.SDS PAGE显示纯化蛋白分子量为55000的单一蛋白带.经活性分析,该酶最适pH值为8.5,米氏常数(Km)为44.2μmol/L.

• 单位
  吉林大学; 北京林业大学; 生命科学学院