miR-641表达对肺腺癌A549细胞增殖和侵袭及迁移能力影响

作者：杨扬; 王凯; 任清泉; 许瑞彬; 郭建峰^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2021, 28(21): 1611-1617.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2021.21.03

• 肺腺癌
• miR-641
• CYR61
• 增殖
• 侵袭
• 迁移

目的探讨miR-641在肺腺癌中的表达情况及其分子生物学作用机制。方法收集延安大学附属医院胸外科2018-01-01-2019-03-31行手术切除的30例肺腺癌患者癌组织及对应周围正常肺组织标本,采用qPCR法检测肺腺癌组织和肺腺癌细胞系A549、H1299和H157中miR-641表达水平,分析miR-641表达与肺腺癌患者临床特征关系。MTT法检测miR-641对肺腺癌A549细胞增殖能力的影响;Transwell侵袭及迁移实验检测miR-641对肺腺癌A549细胞迁移及侵袭能力的影响;靶基因双荧光素酶实验检测miR-641与CYR61的相互作用;PCR和蛋白质印迹法检测A549细胞中CYR61表达。结果 qPCR法检测miR-641在肺腺癌组织、肺组织、A549、H1299、H157和WI-38细胞中表达值分别为0.14±0.02、1.01±0.08、0.35±0.04、0.47±0.05、0.48±0.04、0.98±0.08,F=775.537,P<0.001;肺腺癌组织和肺组织miR-641表达差异有统计学意义,t=57.786,P<0.001。miR-641表达与TNM分期(P=0.004)和淋巴结转移(P=0.013)有关联。NC组和miR-641 mimics组A549细胞增殖活力分别为0.98±0.07和8.23±0.53,t=23.489,P<0.001。miR-641mimics转染A549细胞24、48和72h后,细胞增殖活力分别为1.23±0.19、1.86±0.21和3.05±0.29,F=333.197,P<0.001。Transwell侵袭及迁移实验结果显示,与NC组(101.42±10.14)%和(97.24±7.63)%相比,miR-641mimics组迁移及侵袭力分别为(71.43±6.12)%和(63.47±7.12)%,t值分别为13.620和12.430,均P<0.001。Target Sacn生物信息网站预测miR-641基因序列与CYR61基因序列存在结合片段,靶基因双荧光素酶实验显示,野生型CYR61 3′-UTR相对双荧光素酶活性低于突变型CYR61 3′-UTR,F=49.832,P<0.001。NC组和miR-641mimics组CYR61蛋白表达水平分别为1.00±0.09和0.61±0.10,t=5.024,P=0.004。MTT增殖实验显示,与miR-641mimics相比较,miR-641mimics+pSUPER-CYR61转染A549细胞24、48和72h后细胞增殖活性增加,分别为1.61±0.15、2.29±0.23和3.46±0.34,F=356.301,P<0.001。Transwell迁移实验表明,NC组、miR-641mimics组和miR-641mimics+pSUPER-CYR61组A549细胞迁移力分别为(100.00±7.23)%、(45.61±5.67)%和(97.12±3.17)%,F=53.994,P<0.001;Transwell侵袭实验表明,NC组、miR-641mimics组和miR-641mimics+pSUPER-CYR61组A549细胞侵袭力分别为(100.00±7.82)%、(39.42±6.07)%和(85.62±5.37)%,F=34.893,P<0.001。结论 miR-641在肺腺癌组织和细胞中处于低表达状态,可抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与靶向调节CYR61有关,可成为肺癌基因治疗的潜在靶点。

• 单位
  延安大学附属医院