缺氧诱导因子-1α、生长素基因沉默对CNE-2鼻咽癌细胞放疗及凋亡敏感性的影响

作者：徐茂林; 陈晓华; 孙波

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(18): 2249-2257.

• 缺氧诱导因子-1α
• 生长素
• 鼻咽癌

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、生长素(Survivin)基因沉默对CNE-2鼻咽癌细胞放疗及凋亡敏感性的影响。方法:将合成的靶向沉默HIF-1α和(或) Survivin的microRNA质粒转染到鼻咽癌CNE-2细胞,接种至BALB/c裸鼠右侧腋下,根据接种的转染质粒不同,将裸鼠分为阴性对照组、空载组、联合干扰组、HIF-1α干扰组、Survivin干扰组。成瘤后每3 d放射治疗1次,每次5只,给予5 Gy X-放射治疗,共15 Gy X。放射结束后3 d,处死裸鼠取瘤体计算体积。分别采用RTq PCR、Western blot法检测组织中HIF-1α、Survivin的mRNA及蛋白表达水平,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:①各组CNE-2细胞均能在裸鼠体内良好成瘤,成瘤率100%(35/35)。肿瘤生长曲线显示,随着成瘤时间的延长,空载组、阴性对照组裸鼠的肿瘤生长速度明显更快,肿瘤体积显著更大,其他三组的体积变化率显著较低(P<0. 05)。②阴性对照组与空载组的HIF-1α、Survivin mRNA表达量、蛋白表达量无明显差异(P>0. 05),但显著高于其他三组(P<0. 05)。③TUNEL检测结果显示,正常细胞胞核蓝染,形态均一,无黄染颗粒。凋亡细胞胞核固缩,形态异常,出现棕黄色颗粒。HIF-1α干扰组、Survivin干扰组、联合干扰组之间,两两比较,凋亡细胞数量无明显差异(P>0. 05)。但三组的凋亡细胞数量均明显多于空载组、阴性对照组(P<0. 05)。结论:单独的HIF-1α、Survivin基因干扰能有效增强鼻咽癌移植瘤裸鼠模型对放疗的敏感性,但联合干扰后敏感性未明显增强。

• 单位
  淄博市第一医院