摘要
目的:分离纯化荣保灵芝1号经2种不同培养方式所得子实体、发酵液、菌丝体多糖,并对其结构进行初步表征。方法:采用碱提醇沉工艺,经除蛋白、除色素得到子实体多糖、胞外多糖、胞内多糖;再经DEAE纤维素DE-52柱、Sepharose CL-6B琼脂糖凝胶柱对3种多糖进行分级精制,得到GLP-1-2、ExP-1-2、InP-1-2;采用高效凝胶过滤色谱测定3种精制多糖的相对分子质量;以三氟乙酸(TFA)水解GLP-1-2、ExP-1-2、InP-1-2,PMP柱前衍生HPLC分析3种精制多糖的单糖组成,进一步通过红外、核磁共振技术对3种精制多糖结构进行表征。结果:GLP-1-2、ExP-1-2、InP-1-2相对分子质量分别为26401、5043 u和5325 u。GLP-1-2由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和岩藻糖组成,摩尔比为0.4027:1:0.3878:0.3843:0.3559;Ex P-1-2由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为0.0174:0.0237:1:0.0386:0.0385:0.0272;InP-1-2由含甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为0.0117:1:0.0735:0.3237:0.1779,3种精制多糖的红外、核磁共振图谱显示多糖的特征峰。结论:GLP-1-2、ExP-1-2、InP-1-2均为低分子量的多糖,可以通过液体深层发酵技术获取荣保灵芝1号多糖。
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单位成都大学; 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所; 成都荣保生物科技开发有限公司