DOC-1R缺失型原核表达载体的构建及其重组蛋白的纯化

作者：沈飞; 高锦兰; 王述森; 王世全; 罗阳; 刘琦^*

来源：解剖科学进展, 2018, 24(05): 518-526.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2018.05.019

• DOC-1R
• 重组蛋白
• pull-down

目的构建DOC-1R(deleted in oral cancer-I related)缺失型原核表达载体并纯化其重组蛋白,用于进一步研究DOC-1R互作蛋白及DOC-1R与其相互作用区域。方法经基因重组技术构建分别缺失DOC-1R N端1/3序列及其C端1/3序列的原核表达载体,经测序鉴定、转化至E.coli BL21菌株后,诱导表达两种缺失型GSTDOC-1R重组蛋白,并获得纯化的重组蛋白。结果两载体克隆序列及开放阅读框架均正确,经IPTG诱导在35kD处获得重组蛋白,纯化后得到大量GST-DOC-1R缺失型重组蛋白。结论成功构建了两种pGEX-DOC-1R缺失型原核表达载体,表达并纯化出GST-DOC-1R delN42、GST-DOC-1R delC42融合蛋白。

• 单位
  中国医科大学