氧化槐定碱体内体外通过AKT/mTOR通路调控自噬抑制HBV诱发肝纤维化

作者：崔东涛; 马永超; 徐松涛^*; 李先佳

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2022, 24(02): 723-731.

• 氧化槐定碱
• AKT/mTOR通路
• 自噬
• HBV
• 肝纤维化

目的 观察氧化槐定碱抑制HBV诱发肝纤维化的机制。方法 采用细胞间非接触式的共培养体系进行培养，同时建立HBV诱发肝纤维化的动物模型，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测LX-2细胞抑制率，qRT-PCR法检测α-SMA、collagen Ⅰ mRNA水平，Western blot检测细胞纤维化、自噬、AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平，运用AKT-siRNA、雷帕霉素、自噬抑制剂(3-MA)探讨自噬对肝纤维化的影响。结果 体外实验显示：0.5-32 mg·L-1氧化槐定碱抑制LX-2细胞的增殖(P<0.05)；与对照组比较，氧化槐定碱4、8、16、32 mg·L-1组α-SMA、collagen Ⅰ mRNA表达水平降低，Beclin-1、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ水平上调，p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平下调(P<0.05)；与氧化槐定碱16 mg·L-1组比较，氧化槐定碱16 mg·L-1+AKT-siRNA组抑制率、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ明显增加，p-AKT/AKT、collagen Ⅰ明显降低(P<0.05)；与氧化槐定碱16 mg·L-1组比较，氧化槐定碱16 mg·L-1+3-MA组抑制率、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ明显降低，p-AKT/AKT、collagen Ⅰ明显增加(P<0.05)。体内实验显示：与氧化槐定碱组比较，氧化槐定碱+雷帕霉素组ALT、AST、collagen Ⅰ、p-mTOR/mTOR水平明显下调，LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ水平明显上调；氧化槐定碱+3-MA组LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ水平明显下调，collagen Ⅰ、p-mTOR/mTOR明显上调(均P<0.05)。结论 氧化槐定碱能调控肝细胞自噬，上调细胞纤维化水平，其机制可能与调控AKT/mTOR信号通路有关。

• 单位
  漯河医学高等专科学校