牛骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及其特性鉴定

作者：刘静静; 李玉静; ***; 张静; 吴萌; 杜顺丰; 张岩^*; 李春生^*

来源：食品研究与开发, 2020, 41(08): 187-191.

• 牛骨骼肌肌钙蛋白T
• 单克隆抗体
• 肉源成分
• 免疫鉴别
• 特异性

制备牛骨骼肌肌钙蛋白T的单克隆抗体,评价单抗的特性。肌肉提取物经聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后切胶,用于免疫Balb/c小鼠。经聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)法融合,制备稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法对单抗的效价、亚型、特异性等进行分析。经筛选后,获得2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中3A8特异性好、效价高,为IgG1亚型,亲和常数为8.1×108L/mol。免疫印迹结果显示该单抗能与牛羊的骨骼肌提取物反应,不与鸡鸭的骨骼肌提取物反应。

• 单位
  秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心; 河北交通职业技术学院; 河北省科学院生物研究所; 河北省食品检验研究院