EF-hand对钙调磷酸酶B同源蛋白2的生物学功能影响

作者：张洪菊; 李庆华; 王立洪; 蔺亚妮; 常国强; 庞天翔

来源：中国医药导报, 2012, (35): 28-31.

• 钙调磷酸酶B同源蛋白2
• 钠氢交换蛋白1
• EF-hand
• Ca2 Calcineurin B homologous protein 2(CHP2)
• Na /H exchanger 1
• EF-hand motifs
• Ca2

目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1(NHE1)共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法、免疫共沉淀等手段,明确CHP2结合Ca2+的数量、部位,以及对CHP2与NHE1结合的影响;在血清饥饿条件下,观察表达EF-hand突变的CHP2(NHE1/CHP2-EF3m/4m)对细胞生存的影响。结果分别突变EF-hand结构EF3或EF4,CHP2结合Ca2+减少;同时突变EF3和EF4,CHP2不能结合Ca2+;免...

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室