凡纳滨对虾血蓝蛋白大亚基启动子的克隆及鉴定

作者：郭丽钒; 黄贺楠; 赵琼君; 张涵; 杨昊; 杨培奎^*

来源：韩山师范学院学报, 2023, 44(06): 40-48.

DOI：10.19986/j.cnki.1007-6883.2023.06.006

• 凡纳滨对虾
• 血蓝蛋白大亚基
• 启动子
• 克隆

为了鉴定凡纳滨对虾血蓝蛋白大亚基基因启动子的核心区域和转录因子，探究该基因的转录调控机制．该研究首先通过PCR扩增凡纳滨对虾血蓝蛋白大亚基基因候选启动序列1 969 bp并对其进行测序和生物信息学分析；其次，构建5个不同长度的缺失片段双荧光素酶报告载体，转染至293T细胞，利用双荧光素酶报告分析鉴定其核心区域．进一步通过生物信息学预测全长序列的转录起始位点和CpG岛，并对核心启动子区域的转录因子结合位点进行预测．结果表明，扩增得到的凡纳滨对虾蛋白大亚基启动子序列（HLP2）包含启动子元件；利用双荧光素酶报告载体分析发现HLP2的核心启动子区域（+87/+300 bp）位于起始密码子下游的外显子中，生物信息学分析发现该区域包括多种转录因子结合位点．实验结果为进一步探究对虾血蓝蛋白大亚基基因的转录调控机制提供理论依据．

• 单位
  韩山师范学院; 生命科学与食品工程学院