摘要
目的摸索利用有限稀释法建立抗原特异性T淋巴细胞克隆操作中的最佳培养条件,并探讨利用异体来源的饲养细胞作为替代方案的可行性。方法MTT法测定细胞增殖活性,判断T细胞生长的最佳PHA、IL-2作用浓度以及用丝裂霉素处理法制作饲养细胞的浓度、时间条件,观察IL-4对克隆生长形态的影响。探讨异体饲养细胞进行有限稀释法T细胞克隆时的克隆生长特点和影响因素。结果克隆时PHA25μg/ml、IL-227u/ml,饲养细胞丝裂霉素处理60μg/ml、80min为比较理想的操作条件。IL-4可以促进CD4+细胞亚群的克隆生长,但异体饲养细胞法形成的T细胞克隆的抗原特异性难以保障。结论IL-4对CD4+细胞克隆生长具有促进作用,异体饲养细胞法得到的T细胞克隆抗原特异性不高。
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单位中山大学附属第五医院; 吉林大学第二医院