survivin启动子的克隆及在HeLa细胞中的特异生物活性

作者：吴冰; 王燕; 任继鸿; 赵辉; 张利潮; 张惠中

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2005, 12(2): 116-119.

DOI：10.3872/j.issn.1007-385X.2005.02.008

• survivin基因
• 启动子
• 基因治疗
• HeLa细胞

目的: 构建带有survivin启动子的pGL3Basic真核表达载体,探讨survivin启动子在HeLa细胞中的特异表达活性.方法: 采用PCR技术扩增survivin启动子,插入pGL3Basic载体,构建携带survivin启动子的pGL3Basic真核表达载体(pGL3Basic/ Surp).纯化pGL3Basic/ Surp质粒,用脂质体法转染HeLa细胞和正常血管内皮细胞ECV304,48 h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性.结果: 成功克隆1 kb survivin基因启动子,并构建了携带有survivin基因启动子的pGL3Basic真核表达载体,转染后的Hela细胞荧光素酶活性为2074.2±78.5,而ECV304荧光素酶活性为9.7±1.1.结论: 成功克隆的survivin启动子在HeLa细胞中表现出较高的肿瘤特异性活性,为进一步开发肿瘤的靶向基因治疗奠定了基础.

• 单位
  中心实验室; 唐都医院; 第四军医大学