NLRP3在巨噬细胞抗铜绿假单胞菌感染中的作用

作者：邓秋婵; 匡文斌; 张肄鹏; 张勇刚

来源：广东医学, 2019, 40(03): 321-328.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20183352

• 铜绿假单胞菌
• 角膜炎
• NLRP3炎症小体

目的阐明抗铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa, PA)感染人巨噬细胞后炎症小体激活的情况,并通过沉默炎症小体探讨其在PA感染过程中的作用与机制。方法分别用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)、Real-time PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测PA感染后白细胞介素-1β(IL-1β)、胱冬肽酶-1(caspase-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族成员含热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达情况;siRNA沉默NLRP3炎症小体后ELISA检测IL-1β和caspase-1的分泌,免疫荧光染色和激光共聚焦显微成像直观观察NLRP3炎症小体确定其激活情况,并用细菌平板计数法检测巨噬细胞对PA的杀伤;继而通过Real-time PCR、Griess reaction、流式细胞术、Western blot和免疫荧光实验从抗菌肽、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)和自噬4个方面探讨炎症小体影响PA杀伤的机制。结果 PA感染人巨噬细胞能够激活NLRP3炎症小体。沉默NLRP3炎症小体可促进巨噬细胞对PA的杀伤和自噬的发生,而对抗菌肽、NO和ROS无影响。结论 PA激活的NLRP3炎症小体通过促进自噬从而抑制巨噬细胞对PA的杀伤。

• 单位
  深圳市龙华区中心医院