七彩鲑RAPD反应体系的构建及优化

作者：龚雪芬; 苏军虎; 张艳萍; 娄忠玉; 魏彦明

来源：甘肃农业大学学报, 2011, (05): 12-17.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2011.05.031

• 七彩鲑
• 随机扩增多态性
• 体系构建 Salvelinus fontinalis
• RAPD
• reaction system

以七彩鲑尾鳍为试验材料,对影响七彩鲑随机扩增多态性DNA(RAPD)扩增体系的重要参数进行了优化,建立了七彩鲑RAPD的最适反应体系.七彩鲑RAPD的最佳反应体系为:反应体系25μL,模板DNA的质量浓度4ng/μL,Mg2 浓度2.0mmol/L,dNTP浓度0.5mmol/L,引物浓度0.5μmol/L,Taq酶用量0.04U/μL.扩增程序为94℃预变性4min,94℃变性45s,36℃退火40s,72℃延伸1min,共30个循环,最后72℃延伸8min.

• 单位
  甘肃省冷水性鱼类种质资源与遗传育种重点实验室; 甘肃农业大学; 甘肃省水产研究所; 生命科学技术学院