MNX1在乳腺癌组织中的表达及功能研究

作者：高伊菲; 高舸^*

来源：国际外科学杂志, 2021, 48(07).

• 乳腺肿瘤
• 组织
• 基因表达
• 运动神经元和胰腺同源盒1

目的研究运动神经元和胰腺同源盒1(MNX1)在乳腺癌组织中的表达, 通过构建MNX1沉默的MDA-MB-231细胞株, 检测MNX1对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学功能的作用。方法收集广西医科大学第一附属医院乳腺癌73例患者的73对乳腺癌组织和邻近正常组织进行回顾性研究, 采用qRT-PCR检测MNX1在组织和细胞中的相对表达, 使用Western blotting检测组织中MNX1的蛋白质水平。我们设计了MNX1的shRNA, 构建了低表达的MNX1病毒载体。病毒载体进一步用于感染三阴性乳腺癌细胞。设计沉默效果最好的MNX1靶向沉默乳腺癌细胞株MDAMB-231作为沉默组(shMNX1), 设计空载体慢病毒感染的阴性对照组(Control)以进行后续的细胞功能实验。采用CCK-8实验检测细胞增殖能力, Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力, 用流式细胞仪检测细胞凋亡, 每个实验至少有3次独立实验, 正态分布的计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示, 组间比较采用t检验。结果 qRT-PCR结果显示, 在乳腺癌组织中MNX1基因的表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。Western blotting显示乳腺癌组织中MNX1基因的蛋白表达水平明显高于邻近组织(P<0.01)。CCK-8实验结果显示, 沉默组乳腺癌细胞在24、48和72 h的外径(450 nm)低于阴性对照组(P<0.05), 可以认为沉默MNX1基因可抑制乳腺癌细胞的增殖。Transwell结果显示, 迁移实验中, 沉默组和阴性对照组通过跨室的细胞数分别为217.00±33.23和490.00±45.56;侵袭实验中, 沉默组和阴性对照组通过跨室的细胞数分别为91.00±12.79和419.00±49.37, 可以认为沉默MNX1基因可以抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231的迁移和侵袭能力。在流式细胞术检测细胞凋亡中, 沉默组乳腺癌细胞凋亡率为(3.81±0.41)%, 阴性对照组为(2.13±0.16)%。沉默组乳腺癌细胞凋亡率高于阴性对照组, 说明沉默MNX1基因促进乳腺癌细胞株MDA-MB-231的的凋亡。结论 MNX1在乳腺癌组织中高表达, 沉默MNX1基因的表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭, 促进细胞凋亡。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院; 抚顺市中心医院; 中国医科大学