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摘要
目的 基于白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)过表达对溃疡性结肠炎（UC）的影响及小檗碱（BBR）的干预作用。方法 体外传代培养人结肠癌HT-29细胞。取传3代、对数生长期、生长状态良好的HT-29细胞，随机分为空白对照组、NC mimics组、miR-34a-5p mimics组，NC mimics组和miR-34a-5p mimics组分别转染NC mimics、miR-34a-5p mimics，空白对照组不予转染。转染6 h更换新鲜培养基继续培养48 h，收集细胞，采用RT-qPCR法验证转染效率。收集三组转染后细胞，采用CCK-8法检测细胞活力；分离三组培养上清液，采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量；收集三组转染后细胞，分别采用RT-qPCR法、Western blotting法检测IL-6、STAT3 mRNA和蛋白表达。取HT-29细胞，加入LPS刺激48 h，建立UC细胞模型。取UC细胞，分别加入0、2.5、5、10、20、40、80、160、320μg/mL BBR干预24 h，采用CCK-8法检测细胞活力。随机将UC细胞分为模型组和BBR组，BBR组予BBR干预24 h，模型组不予BBR干预。分离两组培养上清液，采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量；取两组干预24 h细胞，采用RT-qPCR法检测miR-34a-5p以及IL-6、STAT3mRNA表达。结果 miR-34a-5p mimics组miR-34a-5p相对表达量高于NC mimics组和空白对照组（P均0.05）。miR-34a-5p mimics组细胞活力低于NC mimics组和空白对照组（P均0.05）。miR-34a-5p mimics组培养上清液IL-6、IL-1β、TNF-α含量均低于NC mimics组和空白对照组（P均0.05）。miR-34a-5p mimics组IL-6、STAT3 mRNA以及IL-6蛋白相对表达量均低于NC mimics组和空白对照组（P均0.05）。40、80、160、320μg/mL BBR干预24 h UC细胞活力均高于0、2.5、5、10、20μg/mL BBR干预24 h UC细胞（P均<0.05），故选择20μg/mL BBR进行后续实验。BBR组培养上清液IL-6、IL-1β、TNF-α含量均低于模型组（P均<0.05）;BBR组miR-34a-5p相对表达量高于模型组，IL-6、STAT3 mRNA相对表达量均低于模型组（P均<0.05）。结论 miR-34a-5p过表达能够通过抑制IL-6/STAT3信号通路减轻UC炎症反应；BBR则能通过上调miR-34a-5p表达和抑制IL-6/STAT3信号通路，减轻UC炎症反应，阻延UC癌变。
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单位昆明市中医医院; 云南中医药大学; 基础医学院; 中心实验室
