双向电泳分析水蛭酒炙前后差异蛋白表达

作者：马莉; 马琳; 欧阳罗丹; 王玄; 肖小河

来源：中成药, 2017, 39(02): 360-365.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1528.2017.02.027

• 水蛭
• 酒炙
• 差异蛋白
• SDS-PAGE
• 双向电泳

目的采用双向电泳分析水蛭(Hirudo)酒炙前后差异蛋白表达。方法分别采用饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、直接裂解液法提取生水蛭和酒炙水蛭蛋白,十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这3种方法进行筛选,建立双向电泳体系。分析水蛭酒炙前后蛋白表达谱,寻找相关差异蛋白。结果直接裂解液法所得条带数量最多,分布连贯清晰。水蛭酒炙前后蛋白含有量有显著性差异(P<0.01),共发现19个差异蛋白点,其中下调蛋白8个,上调蛋白11个。结论双向电泳所得差异蛋白可作为蛋白标志物以规范水蛭炮制工艺,并确保其稳定性。

• 单位
  解放军302医院; 首都医科大学; 医药学院; 锦州医科大学