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摘要
目的探讨α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在前列腺癌中的表达及沉默AMACR基因对前列腺癌DU145细胞增殖凋亡的作用机制。方法取55例前列腺癌患者的前列腺癌组织及32例良性前列腺增生症患者的良性前列腺增生组织。免疫组化检测两种组织中AMACR表达情况并分析与前列腺癌患者临床特征的关系。将前列腺癌细胞株DU145分为Blank组、pcDNA-AMACR组、pcDNA-AMACR NC组、siRNA-AMACR组、siRNA-AMACR NC组,分别转染相应质粒。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法分别检测细胞中AMACR、核因子-kappa B抑制蛋白(IκBα)、核因子κB(NF-κB)、Ki-67、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(BAX)蛋白和m RNA的表达情况,CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果前列腺癌组织中AMACR的阳性表达率明显高于良性前列腺增生组织(P﹤0.01)。AMACR表达与前列腺癌患者TNM分期、淋巴结转移、病理分级、肿瘤分期和术前前列腺特异性抗原(PSA)水平有关(P﹤0.05)。与pcDNA-AMACR NC组相比,pcDNA-AMACR组AMACR、IκBα、NF-κB、Ki-67、Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均上升,BAX蛋白和mRNA表达水平均下降,细胞增殖能力上升,细胞凋亡率降低。同时,与siRNA-AMACR NC组相比,siRNA-AMACR组AMACR、IκBα、NF-κB、Ki-67、Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均降低,BAX蛋白和mRNA表达水平均上升,细胞增殖能力降低,细胞凋亡率升高。结论下调AMACR基因会抑制NF-κB信号通路的激活,从而抑制前列腺癌细胞的增殖并诱导凋亡。
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