碳氮磷营养对百蕊草悬浮培养细胞生长的影响

作者：黄燕芬; 王自布^*; 施琴; 谢奇

来源：西南农业学报, 2021, 34(12): 2580-2585.

DOI：10.16213/j.cnki.scjas.2021.12.004

• 百蕊草
• 基质营养物质
• 悬浮细胞

目的】建立良好的百蕊草悬浮细胞培养体系,为后续利用基因工程改造百蕊草代谢途径获得高次生代谢产物新品种,实现野生资源的替代奠定基础。【方法】以百蕊草愈伤组织为材料,探寻百蕊草悬浮细胞生长与营养消耗规律的基础上,优化培养液氮和磷的初始投入量及铵态氮和硝态氮的比例(NH4+/NO3-)。【结果】在30 d的培养过程中,悬浮细胞生长曲线出现较明显的延滞期(0～6 d)、对数生长期(7～15 d)、稳定生长期(16～24 d)和衰亡期(24 d后);百蕊草悬浮细胞培养28 d时,起始总氮浓度70 mmol/L、磷酸盐浓度1.3 mmol/L情况下,悬浮细胞干物质量均达最大值,低于或高于此两浓度都不利于细胞的健康生长;在此基础上进行悬浮培养细胞对硝态氮、铵态氮的需求探究。结果发现,培养过程中悬浮细胞生长对硝态氮的消耗多于铵态氮,铵态氮的利用消耗先于硝态氮,铵态氮的浓度过高会抑制细胞生长,NH4+/NO3-为20/50最适于细胞生长。【结论】在培养周期内百蕊草悬浮细胞生长曲线呈"S"形;以MS为基本培养基,氮浓度为70 mmol/L,磷酸盐浓度为1.3 mmol/L,NH4+/NO3-为20/50较有利于百蕊草细胞的悬浮培养;培养基总糖、蔗糖、还原糖以及硝态氮、无机磷的消耗均在其对数生长期较快,铵态氮在生长初期消耗快于硝态氮。

• 单位
  贵州师范学院