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摘要
目的观察小干扰RNA(siRNA)对肾癌786-0细胞株G250基因表达的抑制效果,以建立稳定的RNA干扰(RNAi)技术及用于进一步对G250基因的研究。方法体外合成4条针对G250基因的siRNA和1条阴性对照序列,并利用载体pRNAT-U6.1/Neo构建重组质粒。测序鉴定后,以脂质体介导转染人肾癌786-0细胞株;分别应用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹技术测定G250 mRNA和蛋白的表达情况。结果 DNA测序和酶切鉴定表明针对G250基因的siRNA表达载体构建成功,4条siRNA分别使G250mRNA的表达降低了35.56%、49.27%、45.88%和65.13%,G250...
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