益于猪圆环病毒2型增殖的PK-15细胞系的克隆筛选与应用

作者：白满元; 柳海云; 张韵; 孙世琪; 郭慧琛^*

来源：中国兽医科学, 2018, 48(12): 1489-1496.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2018.0224

• 猪圆环病毒2型
• 细胞克隆
• PK-15细胞克隆株

通过有限稀释法对被猪圆环病毒2型(PCV2)感染的PK-15细胞进行2轮细胞克隆筛选,得到1株对PCV2高度易感且稳定的同源性PK-15细胞克隆株,以提高PCV2在PK-15细胞系中的感染效价。结果显示,利用间接免疫荧光试验(IFA)从成功获得的7株PK-15细胞克隆株中筛选得到3株荧光反应较强的PK-15细胞克隆株。通过IFA、半定量PCR和Western-blot等方法确定PCV2可以在PK-15细胞克隆株2中高效克隆并表达PCV2 Cap蛋白。QPCR结果表明,PCV2感染该PK-15细胞克隆株后第48小时病毒表达量达到最高。这证实,获得的高敏感性PK-15细胞克隆株2可用于持续产出高效价的PCV2以便于相关疫苗和诊断制剂的研制。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室