miR-195负性调控VEGFA抑制子宫内膜癌干细胞干性

作者：张玉虹; 孙喜斌; 石克威; 马会; 于治芳; 陈江平

来源：中国新药与临床杂志, 2020, 39(12): 747-752.

DOI：10.14109/j.cnki.xyylc.2020.12.10

• 子宫内膜肿瘤
• miR-195
• 肿瘤干细胞
• 血管内皮生长因子A
• 化疗敏感性

目的观察miR-195对子宫内膜癌干细胞干性维持和化疗敏感性的影响,及调控血管内皮生长因子A(VEGFA)的相关作用机制。方法选用人源性子宫内膜癌KLE细胞分成空白对照组、空质粒组、VEGFA组、miR-195组和VEGFA+miR-195组,分别转染pc-VEGFA和miR-195 mimic过表达载体。CCK-8法观察细胞增殖和顺铂杀伤率,Transwell法观察细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,平板克隆形成实验观察克隆形成率,RT-PCR法检测细胞VEGFA和miR-195 mRNA表达,Western blot法检测VEGFA蛋白表达,荧光素酶验证miR-195和VEGFA基因突变的关系。结果与空白对照组和空质粒组相比,miR-195组细胞增殖倍数和侵袭数显著下降,顺铂杀伤率显著升高(P <0.05); VEGFA组细胞增殖倍数和侵袭数均升高,顺铂杀伤率显著下降(P <0.05);VEGFA+miR-195组细胞增殖倍数和侵袭数低于VEGFA组,顺铂杀伤率高于VEGFA组(均P <0.05)。空白对照组和空质粒组顺铂的IC50分别为44.40和46.43 mg·L-1,miR-195组和VEGFA组分别为67.13和62.59mg·L-1,VEGFA+miR-195组为28.61mg·L-1。与空白对照组和空质粒组相比,miR-195组肿瘤干细胞克隆形成率降低,miR-195 mRNA表达增加,VEGFA蛋白和mRNA表达降低(均P <0.05); VEGFA+miR-195组肿瘤干细胞克隆形成率及VEGFA蛋白和mRNA表达均低于VEGFA组(P <0.05)。结论 miR-195可抑制子宫内膜癌KLE细胞增殖和侵袭,抑制干细胞干性,对顺铂敏感性增强,其机制与负性调控VEGFA有关。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院