铜绿假单胞菌噬菌体vB＿PaS＿IME307的生物学特性研究及全基因组分析

作者：王灿; 刘慧莹; 高明明; 米丽媛; 喻鑫婷; 米志强; 柏长青

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(19): 2045-2056.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202209112

• 铜绿假单胞菌
• 噬菌体
• 生物学特性
• 基因组学分析

目的 以实验室保存菌株Pa175为宿主菌，从医院污水中分离得到1株铜绿假单胞菌噬菌体，研究其生物学特性及全基因组学特征。方法 利用双层平板法、噬斑法分离并鉴定噬菌体；PEG8000浓缩NaCl沉淀法纯化噬菌体；蔗糖梯度离心进一步纯化噬菌体，经磷钨酸负染染色后，使用透射电子显微镜观察其形态；蛋白酶K/SDS法提取噬菌体DNA,对提取的核酸进行全基因组测序和生物信息学分析。结果 得到1株裂解性铜绿假单胞菌噬菌体vB＿PaS＿IME307,该噬菌体可以形成透明且有晕环的噬菌斑，全基因组大小为51 545 bp。透射电镜结果显示vB＿PaS＿IME307的头部呈正二十面体形状，直径(66±2)nm,尾长(116±2)nm;进化树分析发现该噬菌体为Mccleskeyvirinae病毒属，长尾噬菌体科(Siphoviridae)。生物学特性研究发现：vB＿PaS＿IME307在pH=4.0～11.0、60℃以下能够保持较高活性，感染周期约为60 min,其中包括10 min潜伏期和50 min暴发期，其暴发量为150 PFU/cell。结论 噬菌体vB＿PaS＿IME307具有宿主特异性，对温度和pH具有较好的耐受能力，具有防治铜绿假单胞菌细菌感染的潜力。

• 单位
  安徽医科大学附属阜阳医院; 深圳大学总医院; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 解放军总医院