柱前衍生化RP-HPLC同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量及其多元统计分析

作者：顾志荣; 马转霞; 马天翔; 萨日娜; 刘洁丽; 吴国泰; 祁梅^*; 葛斌^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2020, 26(10): 148-155.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20200711

• 锁阳
• 氨基酸
• 异硫氰酸苯酯
• 柱前衍生化
• 反相高效液相色谱
• 主成分分析
• 系统聚类分析
• 质量评价

目的:建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定不同产区锁阳中17种游离氨基酸含量的方法并进行多元统计分析。方法:采用柱前衍生化RP-HPLC检测,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Wonda Sil C18-WR色谱柱(4. 6 mm×150 mm,5μm),流动相A为0. 05 mol·L-1乙酸钠缓冲液(pH 6. 5),流动相B为乙腈-甲醇-水(3∶1∶1),梯度洗脱,流速0. 8 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温35℃。建立主成分分析(PCA)及系统聚类分析(HCA)模型进行多元统计分析并进行质量评价。结果:从锁阳中共分离鉴定了17种氨基酸,含7种人体必需氨基酸。17种氨基酸在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,r在0. 999 0～0. 999 9;平均回收率在98. 03%～103. 89%,RSD均<3. 5%。PCA和HCA结果基本一致,均可将12个市级产区明显区分为6个区域; PCA可根据不同市级或省级产区对锁阳进行聚类,而HCA可根据省级产区对锁阳进行归类,说明不同市级、省级产区锁阳的氨基酸含量具有产区差异性,且含量分布表现出明显的地域聚集性特点; PCA表明甘肃、内蒙古所产锁阳氨基酸含量较高,质量较佳。结论:所建方法可用于不同产区锁阳中17种游离氨基酸的含量测定,为其综合质量评价提供参考。

• 单位
  甘肃省人民医院; 甘肃中医药大学