摘要
为建立检测兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60上HBGAs表位抗体的间接ELISA方法,将谷胱甘肽磁珠纯化的含HBGAs表位的重组蛋白包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被质量浓度为6μg/mL,标准阴阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用5%脱脂乳,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶10 000。经特异性试验、敏感性试验、血清抗体检测,结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性,也可以检测出疫苗免疫后不同时间兔血清的抗体水平变化。说明以HBGAs表位为包被抗原建立了间接ELISA方法,为RHD疫苗的免疫效力评估提供了可行的技术手段。
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