乳腺生物反应器特异调控序列的构建

作者：蒋小玲; 张红梅; 徐六妹; 王火生; 乐晓华; 李丽雄; 周伯平

来源：中国生物制品学杂志, 2006, 19(3): 275-277,281.

DOI：10.3969/j.issn.1004-5503.2006.03.018

• 乳腺生物反应器
• 特异调控序列
• 牛α-S1酪蛋白

目的构建可以指导外源基因在动物乳腺组织特异表达的调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列.方法 提取新生小牛肝组织的DNA,应用PCR分段扩增牛α-S1酪蛋白基因调控序列,经琼脂糖凝胶电泳鉴定后测序,再将各基因片段连接成完整的序列.并将外源基因ALB亚克隆入该调控序列内,转染C127细胞,经免疫组化法检测其表达情况.结果 乳腺生物反应器特异调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列,包括其1.8kb上游序列、第一外显子、第一内含子、包含翻译起始位点的第二外显子和部分第二内含子,及其最后一个内含子的大部分、最后一个不翻译的外显子(含多聚A信号)及侧翼区全长5.8kb.位于该调控序列内的ALB高效表达.结论成功构建乳腺生物反应器特异调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列,此调控序列对外源基因的表达有正调控作用.

• 单位
  深圳市东湖医院