奶牛孕酮单克隆抗体的制备与初步鉴定

作者：张洪友; 曾文渊; 张乃生; 杨正涛; 夏成; 吴凌

来源：黑龙江畜牧兽医, 2009, (15): 46-48.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2009.15.056

• 孕酮
• 免疫抗原
• 纯化
• 杂交瘤
• 单克隆抗体

试验应用淋巴细胞杂交瘤技术,以制备的P4免疫抗原免疫Balb/c小鼠为试验动物,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA方法进行筛选,采用有限稀释法进行细胞克隆,经过3次克隆筛选,最终获得2株能稳定分泌P4单克隆抗体的杂交瘤细胞系,分别命名为8G6、11A11。杂交瘤细胞培养上清液和小鼠腹水中2株单抗ELISA效价分别为15∶12 000,1∶216 000。单克隆抗体与检测抗原和对照均不发生交叉反应,显示出良好的特异性,灵敏度高,且8G6的亲和力优于11A11。奶牛孕酮单克隆抗体的获得为P4检测试剂盒的研制奠定了基础。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院; 吉林大学