摘要
目的 探讨外源性P物质(substance P,SP)对高糖条件下人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)增殖及其单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)合成的影响. 方法 用高糖DMEM培养基培养HSF;并用SP在不同浓度和不同时相点处理,ELISA法检测细胞上清液中MCP-1分泌水平,观察时问与剂量的时效关系;半定量RT-PCR、实时荧光定量(Real Time)-PCR、Western blot分别检测各组HSF内MCP-1 mRNA的表达和蛋白的合成;细胞增殖试剂盒(cell counting Kit-8,CCK-8)检测不同浓度SP作用HSF后的增殖情况. 结果 经SP处理后8h可检测到MCP-1分泌增强(P<0.05),24h达峰值(P<0.01),在10,100 nmol/L的浓度下分泌最多(P<0.01);SP可明显增加高糖条件下HSF MCP-1mRNA的表达和蛋白的合成,特别是在10 nmol/L的浓度下表达最为显著(P<0.01);在10,1 000nmol/L的SP均明显促进HSF的增殖(P<0.05). 结论 SP可促进高糖条件下HSF的增殖及MCP-1的合成,对促进糖尿病创面修复可能有一定意义.
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单位上海交通大学医学院附属第三人民医院