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摘要
目的:构建新型简便可靠的体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系。方法:从SD大鼠大脑和血清中提取乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE),应用Ellman比色法构建体外AChE和BuChE抑制剂筛选实验体系。结果:选择10倍稀释的雄性大鼠脑匀浆液〔蛋白浓度(1.69±0.10)mg·mL-1〕和5倍稀释的血清作为AChE/BuChE酶源,使用AChE/BuChE抑制剂他克林作为参考。他克林对AChE/BuChE的半数抑制浓度(IC50)分别为262 nmol·L-1和168 nmol·L-1,体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系构建成功。在等量蛋白浓度情况下,雌性大鼠脑匀浆液中AChE酶活性为雄性大鼠的1.84倍。结论:本研究从大鼠大脑和血清里分别提取AChE和BuChE粗酶,构建了一种新型的简单易行且稳定可靠的AChE/BuChE抑制剂筛选平台。
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