一种新的人Beclin1转录本的克隆、原核表达和纯化

作者：杨秀林; 张亚平; 何全中; 谢云飞; 潘莹

来源：新乡医学院学报, 2017, 34(08): 682-686.

• DEL-E8-E10
• 转录本
• 纯化

目的克隆新的人Beclin1转录本DEL-E8-E10并对其所编码的蛋白质进行表达和纯化。方法以SiHa细胞的cDNA作为模板进行聚合酶链式反应(PCR)扩增DEL-E8-E10基因,构建原核表达载体pET32a-DEL-E8-E10。在大肠杆菌中诱导表达His-DEL-E8-E10融合蛋白,利用镍柱亲和层析纯化His-DEL-E8-E10融合蛋白。结果克隆到DEL-E8-E10基因,成功构建原核表达载体pET32a-DEL-E8-E10,并获得可溶性表达。利用镍柱亲和层析纯化HisDEL-E8-E10融合蛋白。结论纯化出His-DEL-E8-E10融合蛋白,为进一步研究新的转录本DEL-E8-E10编码蛋白质与宫颈癌之间的关系提供了实验基础。

• 单位
  新乡医学院; 新乡医学院第三附属医院; 生命科学技术学院