NY-ESO-1/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定

作者：汤蕾; 宋朝君; 孙元杰; 李娜; 魏玉英; 孙奕; 杨琨

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (10): 1094-1097.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006584

• NY-ESO-1
• GST
• 融合蛋白
• 原核表达
• 纯化 NY-ESO-1
• GST
• fusion protein
• prokaryotic expression
• purification

目的:构建肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白NY-ESO-1/GST进行纯化和初步鉴定。方法:设计针对NY-ESO-1的特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)从睾丸组织的cDNA文库扩增NY-ESO-1基因片段,经上下游引物所引入的EcoR I和Xho I双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游,构建重组表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST融合蛋白,经不同浓度尿素洗脱纯化后,表达产物通过SDS-PAGE和Western...

• 单位
  中国人民武装警察部队后勤学院; 第四军医大学