转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞转分化的蛋白质组学研究

作者：文琼; 余学清; 黄昭; 李晓艳; 骆宁; 聂静; 刘炜; 黎明涛

来源：中华肾脏病杂志, 2008, 24(1): 18-23.

DOI：10.3321/j.issn:1001-7097.2008.01.005

• 蛋白质组学
• 转化生长因子β
• 上皮细胞
• 转分化

目的 研究转化生长因子(TGF)β1诱导肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化(EMT)过程中相关靶蛋白的表达变化.方法 应用比较蛋白质组学方法.用双向凝胶电泳(2-DE)对TGF-β1刺激组和对照组NRK52E细胞总蛋白进行分离.两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定,并用RT-PCR和Western印迹在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证.结果 鉴定出22个差异蛋白,包括与细胞骨架相关蛋白、参与物质转化和能量代谢的酶类、与蛋白翻译后修饰相关蛋白、细胞因子及其他蛋白等.应用RT-PCR验证了转胶蛋白(transgelin)、ATP合成酶α亚型、苹果酸脱氢酶、丝氨酸(半胱氨酸)蛋白酶抑制因子、泛素结合酶9(Ubc9)和表皮生长因子8在mRNA水平的表达差异,与2-DE结果一致.用Western印迹验证了transgelin、ATP合成酶α亚型两种蛋白的表达差异,亦与2-DE结果一致.结论 TGF-β1刺激NRK52E细胞EMT发生过程中可诱导包括与细胞骨架相关蛋白、与翻译后修饰相关蛋白、代谢酶类及细胞因子等多种蛋白表达变化.本研究结果有助于深入理解EMT的具体分子机制及阐明肾脏疾病慢性进展的机制.

• 单位
  中山大学附属第一医院; 中山大学中山医学院