基于转录组与体外实验揭示泽泻醇B抑制神经胶质瘤细胞增殖作用的机制

作者：文香月; 徐小妹; 张亚敏; 卢雪花; 李丽莎; 江若红; 林文津^*

来源：中药材, 2023, (08): 2030-2038.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2023.08.032

• 人脑胶质瘤细胞T98G
• MAPK信号通路
• 转录组测序
• 泽泻醇B

目的:分析人脑胶质瘤细胞系T98G对泽泻醇B的反应及其作用机制。方法:泽泻醇B处理人脑胶质瘤细胞T98G后,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞活力,划痕、侵袭和迁移实验评估细胞运动能力。用10、20μmol/L泽泻醇B处理T98G细胞,利用高通量测序技术获得基因表达谱,并对差异表达基因(DEGs)进行生物信息学分析。结合转录组测序分析结果和细胞表型,筛选出肿瘤相关靶点进行qPCR和Western Blot验证。结果:体外研究显示与空白对照组比较,泽泻醇B能有效抑制人脑胶质瘤细胞T98G增殖、侵袭和迁移。转录组测序结果显示泽泻醇B 10μmol/L组中,有差异表达基因3 235个,其中上调基因1 502个,下调基因1 733个;泽泻醇B 20μmol/L组中,有差异基因4 957个,其中上调基因2 362个,下调基因2 595个。KEGG通路结果显示,泽泻醇B 10、20μmol/L组差异表达基因共富集通路包括MAPK信号通路、细胞周期、肿瘤microRN As、P53信号通路、DNA复制,其中MAPK信号通路差异基因富集数量最多。qPCR显示DEGsmRNA表达量变化与转录组测序基本一致。结论:泽泻醇B能有效抑制神经胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移,其发挥抗细胞增殖作用机制可能与抑制MAPK信号通路上GRB2、AKT1、ERK1/2等关键靶点表达和磷酸化有关;其抑制T98G细胞侵袭和迁移的能力可能与下调MMP1和MMP3蛋白表达,升高TIMP3蛋白表达有关。

• 单位
  福建中医药大学; 福建省医学科学研究院