棉铃虫中肠微粒体P450的分离纯化

作者：郑明奇; 张文吉; 邱星辉; 冷欣夫

来源：昆虫学报, 2005, 48(03): 359-364.

DOI：10.3321/j.issn:0454-6296.2005.03.008

• 棉铃虫
• 细胞色素P450
• 聚乙二醇沉淀
• 高效疏水作用色谱
• 高效离子交换色谱
• 纯化 Helicoverpa armigera
• cytochrome P450
• PEG precipitation
• high performance hydrophobic interaction chromatography
• high performance ion exchange chromatography
• purification

为深入研究棉铃虫Helicoverpaarmigera细胞色素P450的结构与功能,需要分离不同型的P450蛋白。作者建立了适用于棉铃虫中肠微粒体P450的纯化方法,包括聚乙二醇8000(PEG8000)沉淀、高效疏水作用色谱(HPHIC)和高效离子交换色谱(HPIEC)等连续分离步骤。SDS_PAGE(银染)显示,棉铃虫中肠微粒体经以上步骤分离纯化后,在含P450的馏分中检测出分子量分别为58kD、47kD、56kD和45kD的4条蛋白带。P450的回收率为14.3%,比含量提高了39倍。

• 单位
  农业部; 中国科学院动物研究所; 农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室; 中国农业大学