MiR-106a-5p靶向TGFBR2调控肺腺癌细胞增殖和迁移侵袭机制探讨

作者：张成伟^*; 毕昕; 闫睿

来源：中华肿瘤防治杂志, 2020, 27(16): 1284-1297.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.16.02

• 肺腺癌
• miR-106a-5p
• TGFBR2
• 细胞增殖
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的 MiR-106a-5p表达异常与多种癌症的增殖、迁移和侵袭功能密切相关,如肾细胞癌、结肠癌和骨肉瘤等。本研究探讨miR-106a-5p重组人转化生长因子B受体-2(recombinant transforming growth factor beta receptor Ⅱ,TGFBR2)对肺腺癌增殖、迁移和侵袭的影响和其分子机制。方法starBase 3.0平台调取并分析TCGA数据库中miR-106a-5p在肺腺癌组织中的表达谱;选取肺腺癌细胞系PC-9和H1299,实时荧光定量PCR检测miR-106a-5p在肺腺癌细胞系中的表达。设置miR-NC组和miR-106a-5p inhibitor组,CCK-8实验、Transwell实验检测miR-106a-5p表达下调对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。荧光素酶报告基因检测miR-106a-5p靶向TGFBR2。qRT-PCR、蛋白质印迹等检测miR-106a-5p对TGFBR2的mRNA和蛋白表达的影响。分析TGFBR2表达与肺腺癌患者生存预后之间的相关性。结果 miR-106a-5p在肺腺癌组织和细胞中呈现高表达,均P<0.05;CCK-8检测细胞增殖结果显示,在第3、4和5天时,PC-9细胞的miR-106a-5p inhibitor组细胞增殖活性低于miR-NC组细胞增殖活性,P3d=0.001,P4d=0.001,P5d=0.001,且H1299细胞的miR-106a-5p inhibitor组细胞增殖活性低于miR-NC组细胞增殖活性,P3d=0.001,P4d=0.001,P5d=0.001。Transwell迁移实验结果提示,肺腺癌PC-9细胞中的迁移数目miR-106a-5p inhibitor组为21.32±2.68,对照miR-NC组为108.74±3.89,差异有统计学意义t=23.72,P<0.001;肺腺癌H1299细胞中的迁移数目miR-106a-5p inhibitor组为23.19±3.07,NC组为123.52±6.44,差异有统计学意义,t=42.46,P<0.001。Transwell侵袭实验结果显示,肺腺癌PC-9细胞中的侵袭数目miR-106a-5p inhibitor组为17.38±1.25,miR-NC组为62.38±3.06,差异有统计学意义,t=23.73,P=0.001;肺腺癌H1299细胞中的侵袭数目miR-106a-5p inhibitor组为16.48±1.36,miR-NC组为57.22±4.01,差异有统计学意义,t=17.72,P=0.007。荧光素酶报告基因显示TGFBR2是miR-106a-5p的靶基因,miR-106a-5p负向调控TGFBR2的表达。CCK-8方法检测TGFBR2过表达对肺腺癌细胞增殖的影响的结果显示,在第3、4和5天时,PC-9细胞的TGFBR2组细胞增殖活性低于Vector组细胞增殖活性,P3d=0.001,P4d=0.001,P5d=0.001,且H1299细胞的TGFBR2组细胞增殖活性低于对应Vector组细胞增殖活性,P3d=0.001,P4d=0.001,P5d<0.001。Transwell迁移实验结果显示,PC-9细胞迁移数目TGFBR2组为73.25±3.14,Vector组为123.15±4.01,差异有统计学意义,t=25.76,P<0.001;H1299细胞迁移数目TGFBR2组为69.16±2.49,Vector组为121.58±2.39,差异有统计学意义,t=38.76,P<0.001;Transwell侵袭实验结果显示,PC-9细胞侵袭数目TGFBR2组为36.48±1.16,Vector组为89.25±2.39,差异有统计学意义,t=21.73,P=0.005;H1299细胞侵袭数目TGFBR2组为39.35±2.35,Vector组为87.36±3.05,差异有统计学意义,t=18.36,P=0.007。结论 miR-106a-5p通过抑制TGFBR2的表达促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,在肺腺癌发生发展中起着重要的作用,该结果为肺腺癌患者的生存预后提供理论指导。

• 单位
  解放军总医院