circ＿0007762通过miR-18a-5p调节肺成纤维细胞自噬的机制研究

作者：黄彬; 张军; 郑金旭^*; 丁慢玲; 吴妍

来源：天津医药, 2022, 50(06): 571-578.

• 特发性肺纤维化
• 自噬
• 细胞增殖
• 成纤维细胞
• 转化生长因子β
• circ＿0007762
• miR-18a-5p

目的 探索circ＿0007762和miR-18a-5p的相互作用及在肺成纤维细胞中的作用。方法 利用生物信息学分析circ＿0007762在特发性肺纤维化（IPF）患者的表达并筛选其miRNA靶标，在转化生长因子（TGF）-β1干预的肺成纤维细胞HFL1中验证其表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-18a-5p mimics与报告基因载体共转染后的荧光素酶活性。CCK-8法检测circ＿0007762、miR-18a-5p敲低及TGF-β1、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预后的细胞活力。Western blot检测circ＿0007762、miR-18a-5p敲低及TGF-β1、3-MA干预后的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagenⅠ）、P62及微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)水平。结果 HFL1细胞中，TGF-β1组较Control组circ＿0007762表达水平上调，miR-18a-5p表达下调（P<0.05）。在circ＿0007762野生型载体中，过表达miR-18a-5p抑制了荧光素酶活性（P<0.05）。circ＿0007762敲低后细胞增殖活力下降，并由miR-18a-5p的抑制而恢复，同时3-MA可逆转TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖（P<0.05）。TGF-β1促进α-SMA、collagenⅠ及LC3BⅡ/Ⅰ表达，而抑制P62水平（P<0.05）。相较于TGF-β1+si-NC组，TGF-β1+si-circ＿0007762组P62表达上调，其余蛋白下调，并能由miR-18a-5p的抑制而逆转（P<0.05）。此外，3-MA增强了P62的表达而降低了α-SMA、collagenⅠ的表达及LC3BⅡ/Ⅰ水平（P<0.05）。结论 circ＿0007762可与miR-18a-5p相互作用，通过激活自噬促进肺成纤维细胞增殖，诱导纤维化相关表型。

• 单位
  江苏大学; 江苏大学附属医院