摘要
目的探讨神经干细胞转染的新方法,并观察转染后目的基因的表达情况。方法原代培养神经干细胞,运用jetPEI转染试剂将目的基因胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和内皮素B受体基因(EDNRB基因)共转染至神经干细胞内,免疫荧光显微镜观察、流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,测定转染效率,RT-PCR检测目的基因表达情况。结果成功培养出可用于基因转染的神经干细胞,转染后24h即可在免疫荧光显微镜下观察到GFP表达,流式细胞仪显示24、48和72h转染效率分别为15.36%、24.67%和25.73%。RT-PCR显示目的基因在神经干细胞内成功表达。结论运用jetPEI成功将目的基因转染至神经干细胞内,为相关神经变性疾病的基因治疗打下了实验基础。
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院