摘要
目的 探讨冬虫夏草提取液(Cordyceps sinensis extract,CSE)对去卵巢小鼠骨量流失的保护作用以及对核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)诱导的破骨细胞分化及其功能的影响。方法 从C57BL/6小鼠骨髓中提取巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs);在破骨细胞分化过程中,加入CSE干预处理,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色分析破骨细胞数量;将接近成熟的破骨细胞种于羟基磷灰石板,观测骨陷窝面积;使用DAPI和鬼笔环肽对破骨细胞肌动蛋白环(F-actin)进行染色,观测环内细胞核数量和环形态;使用q-PCR检测DC-STAMP、ATP6V0d2、TRAP、CTSK、NFATc1的表达;使用Western blot检测MAPK通路蛋白的表达;构建去卵巢小鼠,每天灌胃给予CSE,治疗6周取小鼠股骨进行形态学分析以及ELISA检测外周血中骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(BGP)、TRAP含量。结果 CSE显著性地抑制了破骨细胞的分化,且呈剂量依赖性;并且主要作用于破骨细胞分化的早期阶段;也抑制了F-actin环的形成,减少了骨陷窝面积;同时抑制DC-STAMP、ATP6V0d2、TRAP、CTSK、NFATc1的表达和MAPK通路JNK、ERK和P38的激活;CSE治疗也可减缓小鼠的骨量流失,提高血清中ALP、BGP含量,降低TRAP含量。结论 CSE通过抑制MAPK通路激活,从而抑制破骨细胞分化及其功能,并对去卵巢小鼠的骨量流失具有良好的保护作用。
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单位江西中医药大学药学院