金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因的克隆与表达

作者：顾冰倩; 龚奕; 何颖芝; 张玲莉; 何文迪; 夏佳音; 陈新江^*

来源：国际检验医学杂志, 2018, 39(23): 2876-2878.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4130.2018.23.008

• 葡萄球菌,金黄色
• 药物释放系统
• 克隆,生物
• 基因表达
• N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶

目的对金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因(APE)进行克隆、鉴定与表达,为新型抗菌药物的设计提供参考依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增APE基因,将扩增产物酶切后与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建表达APE的重组质粒,将重组质粒先转化大肠杆菌TG1内并提取质粒,经PCR、双酶切鉴定后再转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),对转化菌株进行诱导后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果构建了表达载体pET-32a(+)-APE,在37℃经异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导时获得表达,表达的蛋白质相对分子质量为45.2×103。结论 APE基因成功克隆到表达质粒内并获得了表达。

• 单位
  宁波卫生职业技术学院; 浙江医药高等专科学校