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摘要
目的构建免疫系统人源化的小鼠模型,并移植入人前列腺癌细胞系,以期用于前列腺癌免疫治疗药物研究。方法利用Ficoll密度梯度离心法,从新鲜的人外周血中分离出单个核细胞(peripheral blood mononucear cells,PBMC),经尾静脉注射NPG小鼠,构建具有人免疫系统的小鼠模型。注射后第3、4、5、6周分别采用断尾法采集小鼠外周血,并用流式细胞仪监测小鼠外周血中人CD45+CD3+T细胞的动态变化水平。在注射后第3周给予小鼠皮下移植1×107个前列腺癌22Rv1细胞,每周两次监测肿瘤生长情况。当肿瘤生长至1000 mm3左右,对小鼠施行安乐死;利用流式细胞术、免疫组化、HE染色等方法分析人源化小鼠外周血、脾及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润情况。结果模型小鼠在移植人PBMC后3～6周期间,外周血中检测到较高水平的CD45+CD3+T细胞。第6周时处死小鼠,HE染色和免疫组化染色结果表明,模型小鼠的脾和肿瘤组织中具有人CD4+、CD8+T细胞的浸润。结论成功构建了前列腺癌免疫人源化小鼠模型,其外周血、脾及前列腺癌肿瘤组织中均有高水平的人源性T细胞浸润,为下一步构建良好的前列腺癌免疫治疗临床前模型奠定了基础。
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