C2株蓝氏贾第鞭毛虫cDNA文库的构建

作者：刘绍伟; 王洋; 田喜凤

来源：河北医科大学学报, 2018, 39(01): 7-10.

• 贾第虫属
• 基因文库
• 双杂交系统技术

目的构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫cDNA文库。方法 Trizol对C2株贾第虫滋养体RNA进行提取,逆转录获得cDNA单链,LD-PCR扩增获得ds cDNA,经纯化后,与pGADT7-Rec共转化酵母株Y187中。通过营养缺陷型平板SD/-Leu培养获得转化子即包含蓝氏贾第鞭毛虫cDNA文库,并对文库的库容及DNA重组率进行鉴定。结果以RNA为模板,经逆转录、LD-PCR、纯化等,得到了较为理想的双链cDNA。将ds cDNA和pGADT7-Rec转化到酵母菌株,经分离培养,最终得到转化成功的酵母转化子,建立了贾第虫的cDNA文库,文库容量为2.715×107/mL,重组率76.7%,插入片段的大小主要集中在3001 000。结论成功的构建了较为理想的C2株贾第虫cDNA文库。

• 单位
  基础医学院; 华北理工大学