野生茯苓鉴定及其木质纤维素降解酶系研究

作者：覃雯; 尹立伟; 胡婷; 杨春成; 武琳; 黄祝; 胡雅楠

来源：广西植物, 2022, 1-13.

• 茯苓
• ITS序列
• 纤维素酶
• 半纤维素酶
• 木质素降解酶

为揭示茯苓木质纤维素降解酶系及培养方式对其主要酶系的影响，该研究测定了茯苓主要木质纤维素降解酶系。首先对野生茯苓菌株进行培养特性的显微观察；再利用3对引物PCR扩增进行系统发育学的鉴定；经定性培养筛选出优势菌株YX1，最后采用酶标仪测定不同条件下纤维素酶、半纤维素酶和木质素降解酶的活力大小。结果表明:（1）茯苓有菌丝体、子实体和菌核3种形态特征。（2）PCR分别获得r DNA-ITS序列1 652 bp、核糖体大亚基序列660 bp和翻译延伸因子序列545 bp，提交至NCBI，登录号分别为ON129554、ON129553和ON155840。（3）纤维素酶和半纤维素酶在有/无松木屑条件下，外切β-葡聚糖酶(CBH)、内切β-葡聚糖酶(EG)和β-葡萄糖苷酶(BGL)最高分泌量分别为16～17、32～35、36～37 U·mL~(-1)；木聚糖酶、甘露聚糖酶和α-葡萄糖苷酶最高分泌量分别为28～38、280～342、9～11 U·mL~(-1)；锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Laccase)、木素过氧化物酶(LiP)这3种木质素降解酶在4种不同培养液中都有微弱的酶活性。综上表明，该研究结合形态学与分子鉴定，明确了野生茯苓YX1的分类地位，与褐腐菌在亲缘关系上既有联系又存在遗传差距，测定结果显示木质纤维素酶中的酶活大小依次为甘露聚糖酶>木聚糖酶>BGL>EG>CBH>α-葡萄糖苷酶>LiP>MnP>Laccase，纤维素酶和半纤维素酶酶活之间存在显著差异(P<0.05)，本研究为茯苓产生木质纤维素降解酶系的降解机制提供了基础酶学参考。

• 单位
  化学化工学院; 生命科学学院; 安庆师范大学