先天性长QT综合征KCNQ1基因定点突变的研究

作者：李伟; 杨钧国; 任法鑫; 康彩练; 张守焰; 徐涛

来源：中华心律失常学杂志, 2005, 9(03): 230-233.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-6638.2005.03.022

• 长QT综合征
• KCNQ1
• 聚合酶链反应
• 定点突变

目的利用聚合酶链反应(PCR)技术对长QT综合征(LQTS)KCNQ1基因进行定点突变的研究。方法利用PCR定点突变技术,首先设计两对引物(包含预定的突变),通过3轮PCR扩增,扩增出含有所需突变位点的片段,然后将片段克隆入T载体中,通过酶切连接的方法将突变点引入到pIRES2EGFPKCNQ1中,随后用Effectene转染试剂介导转染HEK293细胞。结果在真核表达载体pIRES2EGFPKCNQ1基础上获得了KCNQ1cDNAC682T的突变体,测序结果表明在序列中发生了预期的突变。结论KCNQ1定点突变体的构建为进一步的功能研究奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 华中科技大学