MAPK/ERK信号通路在卵巢上皮性癌组织和细胞中的表达及其临床意义

作者：江雪莲; 高景春^*; 姜丽; 张朋新; 亢铁金; 孙倩; 祁文静; 张秋萍; 关宏伟; 石红

来源：中华妇产科杂志, 2019, 54(08): 541-547.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2019.08.007

• 卵巢肿瘤
• 丝裂原激活蛋白激酶类
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 磷酸化

目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织和细胞中的表达及其临床意义。方法 (1)收集2004年1月—2013年12月大连医科大学附属第一医院收治的术后病理检查证实为卵巢癌的104例患者的石蜡标本, 采用免疫组化SP法检测卵巢癌组织中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达, 并分析其与各临床病理特征的关系。(2)蛋白印迹(western blot)法检测MAPK激酶(MEK)抑制剂——司美替尼(AZD6244)作用前后不同卵巢癌细胞(包括SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OVCAR4、OVCAR5、OVCAR8和CAOV3细胞共9种)中p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达, 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的增殖情况, 流式细胞仪检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的凋亡率及细胞周期比例。结果 (1)免疫组化SP法检测显示, p-ERK1/2蛋白的阳性表达率与卵巢癌患者的年龄、病理类型、手术病理分期、术前血清CA125水平均无明显相关性(P>0.05)。进一步分析发现, 在不同病理类型的卵巢癌组织中, p-ERK1/2蛋白的阳性表达率, 高级别浆液性癌、黏液性癌及子宫内膜样癌均低于低级别浆液性癌(LGSC), 分别比较, 差异均有统计学意义(P<0.05);而透明细胞癌与LGSC比较, 差异则无统计学意义(P=0.196)。(2)western blot法检测显示, p-ERK1/2、ERK1/2蛋白在9种卵巢癌细胞中均有不同程度的表达;不同浓度(5、10 μmol/L)的AZD6244分别作用于OVCAR5和OVCAR8细胞后, 均可抑制p-ERK1/2、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达, 且AZD6244作用后可伴有PARP裂解片段的出现。MTT比色法检测显示, 不同浓度(0、2.5、5、10、25、50、100 μmol/L)的AZD6244作用后, OVCAR5、OVCAR8和A2780S细胞增殖的抑制率均随着AZD6244浓度的增高而降低, 呈显著的浓度依赖性(P<0.05)。流式细胞仪检测显示, 不同浓度(0、5、10 μmol/L)的AZD6244作用后, OVCAR5、OVCAR8和A2780S细胞的凋亡率均随着AZD6244浓度的增高而增高, 呈显著的浓度依赖性(P<0.01);OVCAR5和OVCAR8细胞的G0/G1期比例显著增高, S期比例显著降低, 呈显著的浓度依赖性(P<0.05)。结论作为MAPK/ERK信号通路的活化形式和功能单位, p-ERK1/2蛋白在卵巢癌组织和细胞中均有不同程度的表达, MEK抑制剂可抑制卵巢癌细胞的增殖、诱发卵巢癌细胞的凋亡。提示, MAPK/ERK信号通路可能在卵巢癌发生、发展中起一定作用, 抑制该信号通路有望成为临床治疗卵巢癌的新靶点。

• 单位
  大连医科大学附属第一医院; 重庆医科大学