番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法的建立

作者：叶伟成; 余斌; 刘跃生; 华炯钢; 云涛; 张存

来源：浙江农业学报, 2014, 26(06): 1453-1456.

• 番鸭呼肠孤病毒
• RT-PCR
• σA基因
• 通用检测方法

根据经典和新型水禽呼肠孤病毒σA基因的保守序列设计一对PCR引物,通过优化病毒RNA提取方法和PCR条件,建立了番鸭呼肠孤病毒通用RT-PCR检测方法。该方法可自1株经典型或4株新型水禽呼肠孤病毒特异性扩增出436 bp条带,其最低病毒检出量为3.6 TCID50,而对鸭甲肝病毒、鸭瘟病毒、新城疫病毒、坦布苏病毒、番鸭细小病毒、产蛋下降综合征病毒和H9N2亚型禽流感病毒扩增均为阴性。对20112012采集的224份(番鸭74、鹅68、鸭82)疑似临床病料进行检测,结果 56份为阳性,番鸭、鸭和鹅阳性率分别为59.5%(44/74),11.0%(9/82)和4.4%(3/68),表明水禽呼肠孤病毒主要在番鸭中流行。

• 单位
  嘉兴职业技术学院; 浙江省农业科学院