摘要

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)SCAMP1-AS1在食管癌组织中的表达, 探讨SCAMP1-AS1对食管癌细胞增殖和迁移的影响及可能的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测鄂东医疗集团黄石市中心医院2017年3月至2020年8月手术切除的37例食管癌组织及癌旁组织、4种食管癌细胞(EC9706、TE-13、KYSE30、Eca109)及正常食管上皮细胞HET-1A中SCAMP1-AS1的表达水平。选择表达最低的细胞, 以阴性对照慢病毒(LV-NC)感染为对照组, 以携带SCAMP1-AS1序列的重组慢病毒(LV-SCAMP1-AS1)感染作为实验组。RT-qPCR检测感染后食管癌细胞中SCAMP1-AS1的表达。细胞计数试剂盒8(CCK-8)和Transwell小室法分别检测食管癌细胞的增殖能力和迁移能力。生物信息学方法预测SCAMP1-AS1的靶基因, 双荧光素酶报告实验验证SCAMP1-AS1与靶基因的相互作用。RT-qPCR检测靶基因的表达, Western blotting检测细胞增殖和迁移表型蛋白的表达。结果食管癌组织中SCAMP1-AS1的相对表达水平明显低于癌旁组织(1.26 ± 0.48比8.03 ± 1.17), 差异有统计学意义(P<0.01)。食管癌细胞EC9706、TE-13、KYSE30、Eca109中SCAMP1-AS1的相对表达水平均低于正常食管上皮细胞(0.54 ± 0.05、0.14 ± 0.02、0.46 ± 0.07、0.77 ± 0.05比1.00 ± 0.06), 差异有统计学意义(P<0.05), TE-13细胞中SCAMP1-AS1的表达最低(P<0.01)。与对照组比较, 实验组TE-13细胞中SCAMP1-AS1的表达上调(P<0.01), 细胞的增殖能力降低(P<0.01), 细胞的迁移能力降低(P<0.01)。miR-483-5p是SCAMP1-AS1的直接作用靶点(P<0.01)。与对照组比较, 实验组TE-13细胞中miR-483-5p的表达下调(P<0.01), 细胞增殖和迁移表型蛋白表达降低。结论 lncRNA SCAMP1-AS1在食管癌中表达下调, SCAMP1-AS1可通过靶向调控miR-483-5p的表达抑制食管癌TE-13细胞的增殖能力和迁移能力, SCAMP1-AS1有望成为食管癌潜在的分子治疗靶点。

  • 单位
    湖北理工学院; 黄石市中心医院