fliL基因显著影响艰难拟梭菌运动功能及产孢能力

作者：鲍江舰; 杨君仪; 邵瑞瑞; 张婷; 廖健; 程玉梅; 官志忠; 齐晓岚; 陈峥宏; 洪伟^*; 崔古贞^*

来源：生物工程学报, 2023, 39(04): 1578-1595.

DOI：10.13345/j.cjb.220765

• 艰难拟梭菌
• 非等长同源臂偶联等位交换
• 鞭毛
• fliL
• 突变株表型

鞭毛基底体相关FliL家族蛋白(flagellar basal body-associated FliL family protein, fliL)基因编码FliL蛋白，FliL是一种与鞭毛基体相结合的单跨膜蛋白。为研究艰难拟梭菌fliL基因功能，使用非等长同源臂偶联等位交换(allele-coupled exchange, ACE)方法成功构建了fliL基因缺失(?fliL)和回补(::fliL)突变株，研究突变菌株与野生型菌株(CD630)生长曲线、抗生素敏感性、pH耐受性、运动能力及产孢能力等表型的差异。结果显示，菌株ΔfliL生长速率及最大生物量均小于菌株CD630,::fliL回补菌株生长情况回复至野生型。与CD630菌株相比，ΔfliL对阿莫西林、氨苄青霉素、诺氟沙星的敏感性提高，对卡那霉素、四环素敏感性降低，::fliL抗生素敏感性部分回复至野生型水平。与CD630菌株相比，ΔfliL游泳运动能力显著降低，::fliL运动能力超越野生型菌株CD630。相比菌株CD630，菌株ΔfliL在pH值为5时耐受能力显著提高，在pH值为9时，耐受能力显著降低。除此之外，ΔfliL产孢能力较CD630显著降低，::fliL产孢能力部分恢复。以上结果表明，艰难拟梭菌fliL基因与其运动能力、抗生素敏感性、环境耐受能力和产孢能力密切相关，可能进一步影响艰难拟梭菌菌株的致病力。

• 单位
  贵州医科大学; 基础医学院